A、每组实验的枝条数量和生长状况属于实验的无关变量，为防止无关变量对实验结果的影响，实验中的无关变量应保持相同且适宜，A正确；B、各浓度的2，4-D处理枝条的时间也属于无关变量，也要保持一致，B正确；C、为明确不同2，4-D浓度对生根的影响是促进还是抑制，实验中应设置用等量的蒸馏水处理枝条的对照组，C正确；D、最适浓度是指此浓度条件下促进作用最强，因此略高于最适浓度时，对生根仍起促进作用，D错误．故选：D．
